用途:
用于彎曲菌的馬尿酸鈉水解實驗。
原理:
?? ? ??由于細菌具有馬尿酸鈉水解酶,可以將馬尿酸鈉水解為甘氨酸與苯甲酸,甘氨酸與茚三酮反應,生成紫色化合物。
用法:
1、配制磷酸鹽緩沖液(PBS)。
?磷酸鹽緩沖液(PBS)組分:
?氯化鈉? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?8.5g
?磷酸氫二鈉? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?8.98g
?磷酸二氫鈉? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?2.71g
?蒸餾水? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??1000mL
?2、將0.1g馬尿酸溶于10mL磷酸鹽緩沖液(PBS)中。過濾除菌,無菌條件下,分裝成每管0.4mL。儲存于-20℃。
?3、挑取大量菌落于0.4mL 1%馬尿酸鈉管中,混勻,36℃±1℃水浴2h或36℃±1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)4h。觀察結果時,滴加3.5%茚三酮溶液2~3滴,不要振蕩,再放入36℃±1℃水浴鍋中或培養(yǎng)箱中溫育10min,觀察結果。出現(xiàn)深紫色為陽性,不變色為陰性。
注意事項:
1、使用新鮮的菌做此實驗,并且接種量要大,否則可能出現(xiàn)假陰性。
2、觀察結果需使用茚三酮溶液,茚三酮溶液避光冷藏保存不超過7天。
3、觀察結果在10~15min內(nèi),否則可能出現(xiàn)假陽性反應。
保存條件及效期:
2℃-8℃避光保存兩年。
質控結果:
